ATCC CV-1 细胞株
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细胞常见问题及解决办法：
1）对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。
2）对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时（即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白），此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。
3）细胞漂?。号嘌坎豢?，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。
细胞消化不下来原因：
1）*有可能是你的培养液没有去除干净，因为培养液可以中止消化。所以建议用PBS冲洗两次。然后再加EDTA.
2）加大EDTA的浓度 ，可以选择0.1％与trypsin混合使用，加大以上溶液的体积，可以用2ml。
3）37度温度要够。
4）实时查看，当看到镜下细胞折光度有改变，就是有作用，然后用培养液将细胞冲洗下来。
5）用冰D-Hank's液洗细胞两次；
6）用刚解冻的冷的胰酶（注意不要37度孵育）1-2ml/100ml的培养瓶，开过口的和时间长的都不用。
**共沉淀（co-immunoprecipitation）是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。ATCC CV-1 细胞株
原理：
当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质x的抗体**沉淀x，那么与x在体内结合的蛋白质y也能沉淀下来。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合；也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。
优点：
（1）相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态；
（2）蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响；
（3）可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
缺点：
（1）可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用；
（2）两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用；
（3）必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择*后检测的抗体，所以，若预测不正确，实验就得不到结果，方法本身具有冒险性。
注意事项：
对于贴壁细胞，若细胞漂?。号嘌坎豢?，用75%酒精擦拭后平躺置于培养箱内。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，换成新鲜的培养基；如细胞还不贴壁，将细胞离心收集移到新的培养瓶中，原培养瓶加部分新鲜培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。对于悬浮细胞：收到细胞后，将细胞全部离心，去掉旧的培养基，换成新鲜的培养基继续培养。ATCC ATCC CV-1 细胞株
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ATCC HKBML细胞株
（1）贴壁细胞收到当天有少量或没有飘忽的细胞可以当天换液，因为路途颠簸造成大量飘忽的情况时，请将细胞换液后放置培养箱孵育到**天再做消化传代，请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养
（2）收到细胞后请尽快更换为含10%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清，（原瓶培养基的继续使用时间*长不宜超过72小时）
（3）如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系SUER技术人员
细胞接收后的操作流程与注意事项：
1）贴壁细胞生长缓慢；适当提高血清浓度（*高不能超过20%），或可根据该细胞生长特性生长密度，考虑胰酶消化后，转移到新的培养瓶继续培养
2）如果细胞为贴壁细胞，而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天；同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡，请及时联系实验室技术人员会跟进解决 ATCC CV-1 细胞株
3）生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养
细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
（1）吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通?？刂圃?span>1-2min
